胎牛血清定義:采自胎牛的血清。含有多種生長因子,常用于體外細(xì)胞培養(yǎng)。
胎牛血清成份:
1、性狀、外觀 淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。
2、蛋白質(zhì)含量 3.5%~5.0%( w/v)
3、血紅蛋白含量 ≤ 0.02%( w/v)
4、無菌檢驗 陰性
5、支原體檢驗 陰性
6、細(xì)菌內(nèi)毒素 ≤5(EU/ml)
7、牛腹瀉病毒 陰性
8、大腸桿菌噬菌體 陰性
9、支持細(xì)胞增殖(Sp2/0-Ag14) 生長曲線(接種濃度)zui大增殖濃度≥2.5×106 個/ml 細(xì)胞倍增時間 ≤15h 克隆率 ≥85%
胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛;新牛血清取自出生24小時之內(nèi)的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。
顯然,胎牛血清是品質(zhì)zui高的,因為胎牛還未接觸外界,血清中所含的抗體、補體等對細(xì)胞有害的成分zui少。
胎牛血清功能:
牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量zui大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細(xì)胞生長必須的營養(yǎng)成份,常用于動物細(xì)胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。
1.提供對維持細(xì)胞指數(shù)生長的激素,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。
2. 提供結(jié)合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。
3.有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到解毒作用。
4.是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。
5.起酸堿度緩沖液作用。
6.提供蛋白酶抑制劑,使在細(xì)胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細(xì)胞不受傷害。