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技術(shù)文章

說說ELISA試劑盒在使用時(shí)需要注意什么

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   ELISA試劑盒屬固相免疫測定,抗原、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)生。以抗體包被的夾心法為例,加入板孔中的標(biāo)本,其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結(jié)合的機(jī)會,只有zui貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。
  1.如果對試劑準(zhǔn)備不太注意,在實(shí)驗(yàn)時(shí)將試劑從冰箱中拿出來即用,而忽略了這種做法有可能影響后面溫育時(shí)間不夠的問題影響后面的操作。  
    2. 當(dāng)混合蛋白溶液時(shí)應(yīng)盡量輕緩,避免起泡。
  3. 洗滌過程非常重要,不充分的洗滌易造成假陽性。
  4. 一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
  5. 請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。
  6. 如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高,請先稀釋后再測定。
  7. 在配制標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液工作液時(shí),請以相應(yīng)的稀釋液配制,ELISA試劑盒不能混淆。
  8. 底物請避光保存。
  9、控制好每一步的操作時(shí)間。
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